DNA甲基化检测

DNA甲基化是最早被发现的修饰途径之一，大量研究表明，DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而控制基因表达。DNA甲基化是表观遗传学的重要组成部分，它在维持细胞功能，胚胎发育、生长，癌症产生等诸多方面起到重要的作用。 亚硫酸氢盐反应能够使DNA片段中未甲基化的C与亚硫酸氢钠发生反应，C变成U，经PCR扩增，U变T，而甲基化的C不发生反应，保持不变，从而与未甲基化的C区别开来。目前主要的研究方法也是基于亚硫酸氢盐的处理。艾德科技提供甲基化检测有MSP和BSP方法。

DNA的甲基化主要发生在CpG岛，其甲基化的状态主要是通过亚硫酸盐测序的方法来实现的；样本经亚硫氢酸盐处理后，甲基化的胞嘧啶（C）保持不变，但非甲基化的胞嘧 啶被转化成脲嘧啶，因此在利用该处理产物作为模板的PCR产物中，甲基化的胞嘧啶还是胞嘧啶，但非甲基化胞嘧啶变成了胸腺嘧啶，通过测序可以很容易看出目的片断哪些胞嘧啶是甲基化的，哪些没有，而且还可以对甲基化比例作初步分析。

甲基化特异性PCR（MS-PCR）

在亚硫酸氢盐处理后，即可开展MS-PCR。通常设计两对引物，一对MSP引物扩增经亚硫酸氢盐处理后的DNA模板，而另一对扩增未甲基化片段。若第一对引物能扩增出片段，则说明该检测位点存在甲基化，若第二对引物能扩增出片段，则说明该检测位点不存在甲基化。这种方法灵敏度高，适用性广。

直接测序法（BSP）

是DNA甲基化分析的金标准。它的过程如下：经过亚硫酸氢盐处理后，用PCR扩增目的片段，并对PCR产物进行测序，将序列与未经处理的序列进行比较，判断CpG位点是否发生甲基化。这种方法可靠，且精确度高，能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态。 艾德科技提供PCR产物直接测序和克隆测序。

服务要求

1. 若提供基因组DNA，需≥2ug。
2. 若提供的材料为新鲜组织、血液、细胞等生物材料，请提供足够提取2ug以上基因DNA的材料量。
3. 要检测位点的序列。

服务报告内容

1. 亚硫酸氢盐处理的基因组DNA；
2. 实验报告(包括测序报告)。