A&D Rosseta(DE3) 感受态细胞 货号：C-0811
背景资料：本产品是采用进口Rosseta 菌株，经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA 的热击转化。Rosseta 菌株是携带氯霉素抗性质粒BL21 的衍生菌，补充大肠杆菌缺乏的6 种稀有密码子（AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA）对应的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系统中的表达水平。使用pUC19 质粒检测，转化效率可达107。
基因型：F-ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm lacY1 (DE3) pRARE (argU, argW, ileX, glyT, leuW, proL) (CmR).
产品特点：
1·菌株带有氯霉素抗性.
2.补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA,CCC, GGA)对应的tRNA，提高外源基因、尤其是真核基因在原核系统中的表达水平.
操作步骤:
1． 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以100μl感受态细胞为例。
2． 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3． 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4． 向每个离心管中加入900μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏.
5.取100 μl已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，直至干燥，倒置平板，37℃培养12-16小时。
注意事项：
1． 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心（4,000 rpm，2分钟）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
4． 转化所有步骤均在无菌条件下操作。避免反复化冻。
5． 包装中有0.1 ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。
6． 整个操作过程要轻柔
保存建议:在接收到艾德寄出的试剂盒后请按照说明书建议，-80℃保存六个月。
定购信息：
| 产品名称 |
规格 |
操作手册 |
货号 |
询价 |
| A&D Rosseta(DE3) 感受态细胞 |
10x100 ul |
PDF |
C-0811 |
 |
| A&D Rosseta(DE3) 感受态细胞 |
20x100 ul |
PDF |
C-0812 |
|
| A&D Rosseta(DE3) 感受态细胞 |
40x100 ul |
PDF |
C-0813 |
|
表观遗传学产品全面解决方案列下：
| 产品名称 |
规格 |
操作手册 |
货号 |
询价 |
| DNA羟甲基化定量试剂盒(荧光法) |
48 次 |
PDF |
A-P-1037-48 |
|
| DNA羟甲基化定量试剂盒(荧光法) |
96 次 |
PDF |
A-P-1037-96 |
|
| DNA羟甲基化定量试剂盒(比色法) |
48 次 |
PDF |
A-P-1036-48 |
|
| DNA羟甲基化定量试剂盒(比色法) |
96 次 |
PDF |
A-P-1036-96 |
|
| DNA甲基化定量试剂盒(荧光法) |
48 次 |
PDF |
A-P-1035-48 |
|
| DNA甲基化定量试剂盒(荧光法) |
96 次 |
PDF |
A-P-1035-96 |
|
| DNA甲基化定量试剂盒(比色法) |
48 次 |
PDF |
A-P-1034-48 |
|
| DNA甲基化定量试剂盒(比色法) |
96 次 |
PDF |
A-P-1034-96 |
|
| 通用DNA甲基化定量试剂盒 |
48 次 |
PDF |
A-P-1011-48 |
|
| 通用DNA甲基化定量试剂盒 |
96 次 |
PDF |
A-P-1011-96 |
|
| 超敏DNA甲基化定量试剂盒 |
48 次 |
PDF |
A-P-1021-48 |
|
| 超敏DNA甲基化定量试剂盒 |
96 次 |
PDF |
A-P-1021-96 |
|
| 总DNA甲基化定量试剂盒 |
48 次 |
PDF |
A-P-1014-48 |
|
| 总DNA甲基化定量试剂盒 |
96 次 |
PDF |
A-P-1014-96 |
|
推荐阅读：
关于5-hmC
5-hmC是近年来在动物组织中发现的，由胞嘧啶修饰而来。5-hmC在表观遗传学上的功能可能与5-甲基化胞嘧啶(5-mC)不同。尽管到现在为止还不确知其功能，有研究者猜测它在调控基因的表达与关闭过程中起着重要的作用。5-mC的发现让我们不得不重新评估DNA甲基信息，也不得不监测人类的健康组织和病理组织之间5-mC相对分布的差异。在EPI公司的MethylFlash技术之前，我们还没有发现任何直接的常规方法来检测5- hmC,以及区分5-hmC和5-mC
5-hmC 和 5-mC的区别
时下常用的DNA甲基化分析方法包括限制内切酶酶切和亚硫酸氢盐或MeDIP介导的MS-PCR和测序，这些技术都不适合用来检测5-hmC，因为它与5-mC事实上很难用这类方法区分开来。为了解决这个问题，EPIk研制了MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒(荧光法)。本试剂盒提供了一种很经济的方法来检测5-羟甲基化胞嘧啶，并且区分5-hmC, 5-mC, 和 C，使得研究者能够重新评估他们的DNA甲基化信息，也能够在新样品中寻找DNA羟甲基化。
|
