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024.A&D教你如何轻松开展RNA甲基化定性和定量分析实验!

一,材料准备阶段:

       制备各种各样高质量和高纯度的总RNA。我们为您精心准备了从各种样本(细胞、组织、血液、石蜡包埋组织、各种植物样本、细菌、真菌、等等)中提取总RNA的试剂盒。

 

Cat No.

Product Name Size More Price
A-R1202 RNApure 高纯总RNA提取试剂盒(离心柱) 50次、100次 详情 点击这里给我发消息
A-RH110 细胞/组织总RNA提取试剂盒(离心柱) 50次、200次 详情  
A-R5311 石蜡包埋组织 microRNA快速提取试剂盒(离心柱) 50次、100次 详情  
A-R4002 血液总RNA快速提取试剂盒(离心柱) 50次、100次 详情  
A-RH710 血液总RNA快小量取试剂盒(离心柱) 50次、200次 详情  
A-R3202 多糖多酚植物总RNA快速提取试剂盒(离心柱) 50次、100次 详情  
A-R3302 通用植物总RNA快速提取试剂盒(离心柱) 50次、100次 详情  
A-RH130 植物总RNA提取试剂盒(离心柱) 50次、200次 详情  
A-R5331 通用植物microRNA提取试剂盒(离心柱) 50次、100次 详情  

 

二,亚硫酸盐修饰处理:

       定性分析:采用定性的RNA甲基化修饰试剂盒,进行修饰处理。产品列下:A-P-9003和 A-R-5001

 

Cat No.

Product Name Size More Price
A-P-9003 RNA甲基化修饰试剂盒 50次、100次 详情 点击这里给我发消息
A-R-5001 EZ RNA甲基化修饰试剂盒 50次、200次 详情  

      

       定量分析:采用定量的m6A RNA甲基化定量检测试剂盒(比色法),进行定量检测。产品列下:A-P-9005

    

Cat No.

Product Name Size More Price
A-P-9005 m6A RNA甲基化定量检测试剂盒(比色法) 48次、96次 详情 点击这里给我发消息
A-P-900X m6A RNA甲基化定量检测试剂盒(荧光法) 开发中 详情  

 

三,RT(反转录)成cDNA阶段:

        采用配置了高效反转录的高保真酶,有效进行修饰后RNA的反转。为后续NGS(Next Gen Sequencing)、PCR分析、RNA甲基化分析、测序分析和RNA甲基化文库构建等等应用奠定了良好的产品基础。 

Cat No.

Product Name

Size More Price
A-P-9004 RNApure 高纯总RNA提取试剂盒(离心柱) 50次、100次 详情 点击这里给我发消息

 

四,RT-PCR和测序分析:

        采用配置了高效的热启动酶,有效对反转的cDA进行实时荧光定量PCR。为后续NGS(Next Gen Sequencing)、PCR分析、RNA甲基化分析、测序分析和RNA甲基化文库构建等等应用奠定了良好的产品基础。

  

Cat No.

Product Name

Size More Price
A-P-1028 快速MS-qPCR试剂盒  100次、200次 详情 点击这里给我发消息
A-P-1029 Epiquick qPCR快速试剂盒    100次、200次 详情  

步骤流程/测序分析(一):

RNA甲基化修饰试剂盒步骤示意图 RNA测序分析。从MCF-7细胞中提取RNA,经亚硫酸盐处理。针对处理后的RNA,使用28s RNA引物特异扩增后,合成cDNA并测序。未甲基化的C(#4、#5、#14)转化成U,经扩增T后,测序检测。而甲基化的C(#8)仍保持不变。

步骤流程/测序分析(二):

 

图示:EZ RNA甲基化修饰试剂盒的步骤
经亚硫酸盐处理后测序结果. RNA甲基化C(5-mC)在核苷酸位点# 7使用EZ RNA甲基化修饰试剂盒工具处理。它经RT-PCR、克隆和测序,然后扩增,回收RNA。在位点# 7甲基化胞嘧啶无变化而在# 3、4和13非甲基化胞嘧啶完全转化为尿嘧啶(U)和通过RT-PCR和测序检测到胸腺嘧啶(T)。

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